具體計數的操作如下：

　　1.將計數板及蓋片擦拭干凈，并將蓋片蓋在計數板。

　　2.將ATCC細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。

　　3.計算板四大格細胞總數，壓線細胞只計左側和上方的。然后按公式計算：

　　細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104。

　　說明：公式中除以4，因為計數了4個大格的細胞數。公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為：

　　1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）=0.1mm³，而1ml=1000mm³。

　　注意：鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算，若細胞團10%以上，說明分散不好，需重新制備細胞懸液。

　　ATCC細胞計數要點：

　　1.進行細胞計數時，要求懸液中細胞數目不低于1×107 L-1，如果細胞數目很少要進行離心再懸浮于少量培養液中。

　　2.要求細胞懸液中的細胞分散良好，否則影響計數準確性。

　　3.取樣計數前，應充分混勻細胞懸液，尤其時多次取樣計數時更要注意每次取樣都要混勻，以求計數準確。

　　4.數細胞的原則是只數完整的細胞，若細胞聚集成團時，只按照1個細胞計算。如果細胞壓在格線上時，則只計上線，不計下線，只計右線，不計左線。

　　5.操作時，注意蓋片下不能有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中，否則要重新計數。